Search results
菌落PCR是一种快速鉴定菌落是否含有目的质粒的简单方法。
Colony PCR--菌落PCR. 做实验、写文章有问题？. 快来试试包括 Nature 作者在内上万科研人使用的科研工具包. Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat for 5 min at 95¡C and then spin the condensation down in a microfuge. Set up the PCR reaction as follows: PCR Conditions: 94¡C x 4min ...
一般来说, 菌落 PCR 能够筛选阳性克隆. 象你的实验中出现的这种假阳性结果, 也不是什么太反常的事情, 细菌本身的基因组也是反应系统中的组分, 所以难免有些假阳性的结果. 建议多用几对不同的引物扩增, 以增加真阳性筛选结果. 一般会出现假阳性，可能是粘在 ...
Feb 1, 2024 · 常规的PCR扩增需要进行细菌培养、质粒制备等多步操作后才能进行基因扩增,操作繁琐耗时较长,同时在反复的操作中DNA量损失也较大,产率较低。在1989年 Gussow Clackson3建立了菌落PCR( colony PCR)法,菌落PR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为含目的质粒的阳性菌落,操作简单,快速,在转化鉴定中较常用。
快来试试包括 Nature 作者在内上万科研人使用的科研工具包. This procedure will work for both yeast and E. coli: Take a small colony and suspend it in 5ul of H2O in a PCR tube. Heat for 5 min at 95℃ and then spin the condensation down in a microfuge. Set up the PCR reaction as follows: 5ul H2O + cells. 5ul 5uM primer2.
操作简单便捷： 本试剂盒中提供的Yeast Colony PCR Mix (Green, 2X)已经含有所有的通用组分，用户只需自备引物和水即可对酵母菌落进行PCR扩增。. 大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好；同时Yeast Colony PCR Mix ...
Q：2×T5 Super PCR Mix（Colony）可以直接扩增革兰氏阳性菌吗？ A： 2×T5 Super PCR Mix （ Colony ）可以直接扩增革兰氏阳性菌在内的各种微生物样本。 如果要获得更佳的扩增效果，可以先用 NaOH 溶液做预处理： 10 µL 菌液 +30 µLNaOH 溶液（ 25 mM ）， 98℃ 热处理 10 min 后，离心取上清作为模板。
Apr 22, 2021 · 菌落pcr（colony pcr）可不必提取基因组dna，不必酶切鉴定，而是直接以菌体热解后暴露的dna为模板进行pcr扩增，省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者dna测序分析。蕞后的pcr产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。
Mar 7, 2024 · 菌落PCR步骤：. 1) 设计引物来检测插入片段；. 2) 以裂解细菌的上清液为模板，实验室一般选择挑取单克隆为模板，或摇培后取菌液做模板，建立标准反应体系 (引物，dNTPs，聚合酶，buffer) 后直接进行PCR检测；. 3) 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物以分析扩增片段长度 ...
May 22, 2020 · 菌落pcr中的菌落指的是模板采用的是菌落，与普通的直接用模板DNA略有不同。. 因此 菌落pcr 既可以是p整个质粒，也可以是 目的基因。. 他们不太在一个层次上。. 看你的 引物 是怎么设计的。. pcr原理很简单自己去翻分子生物学，你 pcr 的产物就是引物作为两端 ...
